細(xì)胞凋亡之所以成為人們研究的一個(gè)熱點(diǎn)，在很大程度上決定于細(xì)胞凋亡與臨床病毒的密切關(guān)系。這種關(guān)系不僅表現(xiàn)在凋亡及其機(jī)制的研究，闡明了一大類**病的發(fā)病機(jī)制，而且由此可以導(dǎo)致**新療法的出現(xiàn)。今天百螢就帶大家了解一下細(xì)胞凋亡。
細(xì)胞凋亡：
概念：多細(xì)胞生物的細(xì)胞高度組織和嚴(yán)格調(diào)節(jié)，以確保維持適當(dāng)?shù)姆€(wěn)態(tài)平衡，從而
使生物體*佳地發(fā)揮作用。細(xì)胞通常以兩種方式調(diào)節(jié)：一種通過增殖速率（細(xì)胞分
裂），另一種是凋亡率（細(xì)胞死亡）。通過稱為程序性細(xì)胞死亡或凋亡的過程激活
細(xì)胞內(nèi)死亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑，不再需要的細(xì)胞誘導(dǎo)**。例如，在青蛙發(fā)育期間，在
水生蝌蚪中形成尾部所需的細(xì)胞將啟動(dòng)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致這些細(xì)胞死亡。隨著蝌蚪成
熟為更加陸地的成年青蛙，其尾巴將完全消失。
機(jī)制：細(xì)胞凋亡通常在發(fā)育和衰老期間發(fā)生，并且還作為響應(yīng)細(xì)胞損傷或**反應(yīng)
的防御機(jī)制。它與正常的細(xì)胞更新，**系統(tǒng)的正常發(fā)育和功能，**依賴性萎縮
和化學(xué)誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡有關(guān)。細(xì)胞凋亡的生化事件導(dǎo)致特定的特征或形態(tài)學(xué)細(xì)胞變
化，這對(duì)于受控和**的細(xì)胞死亡是必需的，沒有任何破壞性或不佳的炎癥反應(yīng)。
這些形態(tài)變化包括起泡，細(xì)胞皺縮，核碎裂，染色質(zhì)濃縮和染色體斷裂。細(xì)胞凋亡
始于細(xì)胞萎縮和凝結(jié)。細(xì)胞骨架坍塌，核膜解體，核 DNA 分裂成碎片。細(xì)胞凋亡
過程中產(chǎn)生的這些有機(jī)細(xì)胞片段稱為凋亡小體。然后以這樣的方式修飾細(xì)胞表面以
表達(dá)特定的表面標(biāo)志物，其導(dǎo)致凋亡細(xì)胞在其內(nèi)容物發(fā)生任何泄漏之前被**系統(tǒng)
快速吞噬。凋亡的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)是通過攝取細(xì)胞再循環(huán)凋亡小體或凋亡細(xì)胞的有機(jī)組
分。
區(qū)別：細(xì)胞壞死與程序性細(xì)胞凋亡相反，細(xì)胞和活組織可能由于急性細(xì)胞損傷，感
染或稱為細(xì)胞壞死的炎癥而經(jīng)歷未編程的過早死亡。壞死損害了細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)能力，
導(dǎo)致水和細(xì)胞外離子的流入，導(dǎo)致細(xì)胞膨脹和破裂。壞死細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物溢出
到細(xì)胞外液中，引發(fā)強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，這對(duì)細(xì)胞和組織有廣泛的破壞作用。
半胱氨酸蛋白酶檢測及相關(guān)探針:
細(xì)胞凋亡所必需的機(jī)制涉及高度復(fù)雜的能量依賴性級(jí)聯(lián)途徑，其由稱為半胱天
冬酶的蛋白酶家族調(diào)節(jié)。它們作為潛在酶或稱為 procaspase 的無活性前體存在于
所有細(xì)胞中。Caspase 活性在細(xì)胞內(nèi)受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)，以確保細(xì)胞凋亡在需要時(shí)保
持無活性。當(dāng)需要細(xì)胞凋亡時(shí)，半胱天冬酶通過蛋白水解切割啟動(dòng)活化。這些半胱
天冬酶是與凋亡相關(guān)的復(fù)雜生化事件的關(guān)鍵介質(zhì)。因此，已經(jīng)開發(fā)了各種比色，熒
光和流式細(xì)胞術(shù)半胱天冬酶測定法用于檢測和檢查凋亡誘導(dǎo)細(xì)胞中的活性半胱天冬
酶。引入半胱天冬酶測定技術(shù)以檢查半胱天冬酶活性的活性，底物特異性和活化狀
態(tài)，其對(duì)應(yīng)于其在半胱天冬酶級(jí)聯(lián)途徑中的位置。了解 caspase 級(jí)聯(lián)中每種酶的
特定功能可以作為決定適當(dāng)分析的決定因素，從而產(chǎn)生*佳結(jié)果。熒光和比色測定
使用半胱天冬酶酶活性和特異性報(bào)告底物來產(chǎn)生可檢測的信號(hào)，其可以通過酶標(biāo)儀
測量或用顯微鏡成像。通過半胱天冬酶和報(bào)道底物之間的相互作用引發(fā)底物的切
割。從基材上切割下來，熒光發(fā)色團(tuán)將改變顏色或發(fā)出熒光，該熒光與存在的半胱
天冬酶的活性成比例。與比色測定相比，熒光測定具有輕微的優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗鼈兙哂?/span>
更高的靈敏度，在更寬的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)測量的能力以及具有更低背景信號(hào)的傾向。與
比色測定相關(guān)的主要優(yōu)點(diǎn)是通過可見的顏色變化檢測信號(hào)，并且與其他市售測定相
比，它相對(duì)便宜。
為了檢測和分析半胱天冬酶活性，百螢生物提供多種選擇的半胱天冬酶抑制
劑，熒光半胱天冬酶底物和半胱天冬酶試劑盒。我們的發(fā)光半胱天冬酶底物基于用
（4-PNA）修飾特定肽序列。此外，我們是唯壹一家提供基于 AMC，AFC，羅丹明
110（R110）和 ProRed?的四種不同熒光顏色的多色底物的公司。這些底物可單獨(dú)
購買，也可在試劑盒中一起包裝，以同時(shí)監(jiān)測多重化合物分析中多種半胱天冬酶的活化。
（有關(guān)細(xì)胞凋亡檢測試劑和關(guān)鍵特征的概述，請(qǐng)參見下表）
